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猪托克特诺病毒1型实验步骤
人阅读 发布时间:2023-07-17 14:11
猪托克特诺病毒1型实验步骤:
①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其*溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其*溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。
注意事项:产品仅用于科研1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
phospho-ASK1 (Thr845) 磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体
phospho-ATF2 (Thr69/71) 磷酸化活化复制因子2抗体
Phospho-ATP1A1 (Tyr10) 磷酸化钠钾ATP酶蛋白a1抗体
Phospho-ATP1A1 (Ser16) 磷酸化钠钾ATP酶蛋白a1抗体
Acetyl CoA Carboxylase 乙酰辅酶A羧化酶抗体
Phospho-Acetyl Coenzyme A carboxylase alpha (Ser78) 磷酸化乙酰辅酶A羧化酶抗体
Phospho-Ack1 (Tyr859 + 860) 磷酸化Ack1抗体
phospho-AMPK alpha-1(Ser485+Ser491) 磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体
phospho-AMPK beta 1 (Ser108) 磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶β1抗体
phospho-ALK (Tyr1604) 磷酸化间变型淋巴瘤激酶抗体
phospho-ATM(Ser1981) 磷酸化毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体
phospho-ATP citrate lyase (Ser455) 磷酸化三磷酸腺柠檬酸裂解酶抗体
phospho-ATR (Ser428) 磷酸化ATR抗体
AMN1 细胞核重定位及纺锤体检查点蛋白AMN1抗体
ALG11 天门冬酰胺连接糖基化11抗体
ASF1A 细胞衰老相关蛋白ASF1A抗体
AGPHD1 氨基糖苷类磷酸结构域蛋白抗体
ASGPR1 唾液酸糖蛋白受体1抗体
ARSF 芳香基硫酸酯酶F抗体
AKAP5 A激酶锚定蛋白5抗体
ATXN3L 小脑脊髓共济失调蛋白3抗体
ASTE1 ASTE1蛋白抗体
phospho-APG4B(Ser309) 磷酸化自噬相关蛋白4B抗体
AFAP 微丝相关蛋白1抗体
ADORA1 腺苷A1A受体抗体
ARSB 芳基硫酸酯酶B抗体
①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其*溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其*溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。
注意事项:产品仅用于科研1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
phospho-ASK1 (Thr845) 磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体
phospho-ATF2 (Thr69/71) 磷酸化活化复制因子2抗体
Phospho-ATP1A1 (Tyr10) 磷酸化钠钾ATP酶蛋白a1抗体
Phospho-ATP1A1 (Ser16) 磷酸化钠钾ATP酶蛋白a1抗体
Acetyl CoA Carboxylase 乙酰辅酶A羧化酶抗体
Phospho-Acetyl Coenzyme A carboxylase alpha (Ser78) 磷酸化乙酰辅酶A羧化酶抗体
Phospho-Ack1 (Tyr859 + 860) 磷酸化Ack1抗体
phospho-AMPK alpha-1(Ser485+Ser491) 磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体
phospho-AMPK beta 1 (Ser108) 磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶β1抗体
phospho-ALK (Tyr1604) 磷酸化间变型淋巴瘤激酶抗体
phospho-ATM(Ser1981) 磷酸化毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体
phospho-ATP citrate lyase (Ser455) 磷酸化三磷酸腺柠檬酸裂解酶抗体
phospho-ATR (Ser428) 磷酸化ATR抗体
AMN1 细胞核重定位及纺锤体检查点蛋白AMN1抗体
ALG11 天门冬酰胺连接糖基化11抗体
ASF1A 细胞衰老相关蛋白ASF1A抗体
AGPHD1 氨基糖苷类磷酸结构域蛋白抗体
ASGPR1 唾液酸糖蛋白受体1抗体
ARSF 芳香基硫酸酯酶F抗体
AKAP5 A激酶锚定蛋白5抗体
ATXN3L 小脑脊髓共济失调蛋白3抗体
ASTE1 ASTE1蛋白抗体
phospho-APG4B(Ser309) 磷酸化自噬相关蛋白4B抗体
AFAP 微丝相关蛋白1抗体
ADORA1 腺苷A1A受体抗体
ARSB 芳基硫酸酯酶B抗体