人大内皮素（Big ET）elisa试剂盒操作步骤

1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在di一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟。
phospho-alpha B Crystallin (Ser59)    磷酸化热休克蛋白β5/αb晶体蛋白质/α-晶体蛋白b链抗体
ACTG2    γ2肌动蛋白抗体
AES    gp130结合蛋白GAM抗体
AMHR2    缪勒激素2型受体抗体
ACTR1    激活素受体1A抗体
ACTR2    激活素受体2A抗体
Activin Receptor Type IIB    激活素受体2B抗体
C2orf88     2号染色体开放阅读框88抗体
ARHGEF18    G蛋白偶联受体ARHGEF18抗体
Activin A Receptor Type IB    激活素受体1B抗体
ARA24    雄激素受体相关蛋白24抗体
Amyloid Precursor Protein    淀粉样肽前体蛋白抗体（C端）
ADCY2    腺苷酸环化酶2抗体
APOC3    载脂蛋白C3抗体
Apolipoprotein E4    载脂蛋白E4抗体
AMBRA1    自噬相关基因AMBRA1抗体
Phospho-ATG4C(Ser177)    磷酸化自噬相关蛋白4C抗体
Phospho-ATG4C(Ser398)    磷酸化自噬相关蛋白4C抗体
phospho-ASK1 (Ser966)    磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体
phospho-ATXN1 (Ser775)    磷酸化失调症蛋白1抗体
ATXN1/Ataxin-1    脊髓小脑失调症蛋白1抗体
phospho-Amyloid Precursor Protein (Thr668)    磷酸化APP淀粉样肽前体蛋白抗体
phospho-ASK1 (Ser967)    磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体
phospho-ASK1 (Thr845)    磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体
phospho-ATF2 (Thr69/71)    磷酸化活化复制因子2抗体
Phospho-ATP1A1 (Tyr10)    磷酸化钠钾ATP酶蛋白a1抗体