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半胱氨酰亚砜裂解酶(CSL)生化试剂盒(可见分光光度法)操作步骤

人阅读 发布时间:2022-10-19 14:16

半胱氨酰亚砜裂解酶(CSL)生化试剂盒(可见分光光度法)操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1.        加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.        弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7.       依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
肌球蛋白轻链激酶(MYLK)重组蛋白
肌球蛋白重链1(MYH1)重组蛋白
肌球蛋白重链2(MYH2)重组蛋白
肌细胞生成素(MYOG)重组蛋白
肌原纤蛋白1(FBN1)重组蛋白
基质金属蛋白酶1(MMP1)重组蛋白
基质金属蛋白酶10(MMP10)重组蛋白
基质金属蛋白酶11(MMP11)重组蛋白
基质金属蛋白酶12(MMP12)重组蛋白
基质金属蛋白酶13(MMP13)重组蛋白
基质金属蛋白酶15(MMP15)重组蛋白
基质金属蛋白酶2(MMP2)重组蛋白
基质金属蛋白酶23A(MMP23A)重组蛋白
基质金属蛋白酶23B(MMP23B)重组蛋白
基质金属蛋白酶26(MMP26)重组蛋白
基质金属蛋白酶3(MMP3)重组蛋白
基质金属蛋白酶7(MMP7)重组蛋白
基质金属蛋白酶8(MMP8)重组蛋白
基质金属蛋白酶9(MMP9)重组蛋白
基质细胞衍生因子4(SDF4)重组蛋白
基质重塑关联蛋白5(MXRA5)重组蛋白
激活T-细胞核因子1(NFATC1)重组蛋白
激素敏感性脂肪酶(LIPE)重组蛋白
激肽释放酶10(KLK10)重组蛋白
激肽释放酶11(KLK11)重组蛋白
 

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