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人α1酸性糖蛋白ELISA试剂盒操作步骤

221 人阅读发布时间:2021-10-28 16:38

人α1酸性糖蛋白ELISA试剂盒操作步骤:

1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
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6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。
磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α2抗体
酸性神经酰胺酶1抗体
粘附调节分子1抗体
气味结合蛋白抗体
膜粘连蛋白10抗体
前梯度同源蛋白2抗体
通用转录因子IIA样因子抗体
自噬相关蛋白4D抗体
自噬相关蛋白9A抗体
醛缩酶C抗体
谷草转氨酶抗体
三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员5抗体
三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员8抗体
酰基辅酶A脱氢酶长链抗体
酰基辅酶A脱氢酶中链抗体
酰基辅酶A脱氢酶短链抗体
过氧化物酶酰基辅酶A氧化酶1抗体
磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体
转化生长因子β诱导蛋白3抗体(半胱氨酸和丝氨酸富含核蛋白1)
有丝分裂激酶A/B/C抗体
蛋白酪氨酸激酶ATK抗体
长链脂肪酸辅酶A连接酶1/2抗体
 

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