非冻型拭子 DNA 保存液 A( 无拭子 )样本快速采集及保存

非冻型拭子 DNA 保存液 A( 无拭子 )样本快速采集及保存：
     目前,EBV相关抗体血清学检测己广泛应用于鼻咽癌的大规模人群筛查。对血清学筛查出抗体阳性的高危人群需要进行定期随访,随访的方法仍是以检测血清中EBV抗体及鼻咽镜检查为主,但此时检查方法的特异度已大幅降低,这些高危人群经过反复的检查,血清抗体一直处于阳性状态却无肿瘤的发生,即绝大多数的血清EBV抗体阳性的人群在随访过程中经受了不必要的抗体检测及鼻咽镜检查。因此寻找新的生物学标志物及方法来提高筛查诊断效率对鼻咽癌的筛查有较大的临床意义。

   通过采集鼻咽拭子的方法,检测鼻咽癌高危人群中鼻咽部EBV-DNA载量,并评价这一指标是否能提高随访方法的特异度,减少需要反复随访人群的数量。材料与方法：广西苍梧县作为国家癌症早诊早治示范基地项目点,在2006年1月至2013年6月实施了鼻咽癌早诊早治筛查项目,从苍梧县随机抽取3个镇(石桥、沙头、梨埠镇),30-59岁当地居民纳入筛查对象,筛查对象经过免疫酶法检测血清EB病毒抗体、临床检查(头、颈部、鼻咽部检查)初次筛查后,将EB病毒抗体阳性者定为鼻咽癌高危人群并纳入高危人群队列进行随访。

  在进行高危人群随访复查时,除采血进行免疫酶法检测血清VCA/IgA抗体滴度及临床检查外,同时收集到部分鼻咽癌高危人群鼻咽拭子样本。本研究通过提取鼻咽拭子样本中的DNA,采用实时荧光定量PCR方法(q-PCR)检测EB病毒DNA载量水平,分析鼻咽癌高危人群中血清VCA/IgA抗体滴度及鼻咽部EB病毒DNA载量分布情况,然后分析鼻咽拭子中EB病毒DNA载量与血清VCA/IgA抗体水平的关系,对鼻咽癌病例与高危人群的VCA/IgA与EBV-DNA载量水平进行比较。

   最后,比较不同截断值(cut-off value)下VCA/IgA与EBV-DNA载量的敏感度、特异度、阳性预测值及阴性预测值,制作受试工作者特征曲线(ROC曲线),通过计算曲线下面积(Area under the curve,AUC)评估和对比两个检测指标的诊断效能。在鼻咽癌的高发地区,几乎100%的低分化型鼻咽癌患者携带有EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)。