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影响蛋白实验提取的原因

1059 人阅读发布时间:2017-10-11 09:26

在做蛋白提取实验中,也许有的同学都会提出这样的疑问:每次提蛋白后会将样品在短时间内重复2-3次WB,但是每次跑出的条带趋势不一致,上样量和其他条件都没有变,内参基本是整齐稳定的,不知道为什么目的条带就是不一致?这是什么原因呢?
   影响因素太多了,实验中的任何任何一个步骤稍微有点差异都能产生不同的结果,下面简单说三点,可以用作参考。
1.你蛋白的问题,虽然是同一批的,但是可能在蛋白表达与纯化过程中难免会出现个别的异类;
2.你的操作流程,不管做什么都会有误差,不可能每次的做的都一样,我们只能减少误差,所以可能你觉得自己每次都做得一样,但某个小细节你并没有发现;
3.试剂,也许你的试剂已经不能用了,或者溶度不对了都会影响你的实验。
   做一个实验来说唯一原则就是精准,也许你这次做出来了下次就做不出来了,每次做的时候写下来,不要嫌麻烦,这样做错了能省很多时间。

1-咖啡酰奎宁酸    20mg/支    1-caffeoylquinic acid    HPLC≥98%
洋蓟素(1,3-二咖啡酰奎宁酸)    20mg/支    Cynarin    HPLC≥98%
1,5-二咖啡酰奎宁酸    20mg/支    1,5-Dicaffeoylquinic acid    HPLC≥98%
巴马汀(黄藤素,棕榈碱)    20mg/支    Palmatine    HPLC≥98%
橙皮苷    20mg/支    Hesperidin    HPLC≥98%
新橙皮苷    20mg/支    Neohesperidin    HPLC≥98%

 

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