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柠檬酸合酶(CS)生化试剂盒(可见分光光度法)操作步骤

363 人阅读发布时间:2023-03-15 13:23

柠檬酸合酶(CS)生化试剂盒(可见分光光度法)操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。
 二水合根皮苷    英文名称:    Two hydrated root bark    CAS号:    60-81-1    分子式:    436.41    分子量:    C21H24O10
 己酮可可碱    英文名称:    Own ketone cocoa    CAS号:    6493/5/6    分子式:    278.31    分子量:    C13H18N4O3
 甲基灭草松    英文名称:    Methyl group    CAS号:    61592-45-8    分子式:        分子量:    C11H14N2O3S
 新型杀螨剂    英文名称:    New type of mite    CAS号:    560121-52-0    分子式:        分子量:    
 氧化萎锈灵    英文名称:    Oxycarboxin    CAS号:    5259-88-1    分子式:    267.3    分子量:    C12H13NO4S
 密灭汀A4    英文名称:    Mi A4    CAS号:    51596-11-3    分子式:    542.7    分子量:    C32H46O7
 溴磷松    英文名称:    Bromine and phosphorus    CAS号:    2104-96-3    分子式:    366    分子量:    C8H8BrCl2O3PS
 甜菊双糖甙    英文名称:    Steviolbioside    CAS号:    41093-60-1    分子式:    642.734    分子量:    C32H50O13
 铬花氰R    英文名称:    Chromium cyanide R    CAS号:    3564-18-9    分子式:    536.39    分子量:    C23H15Na3O9S
 特丁噻草隆    英文名称:    Tebuthiuron    CAS号:    34014-18-1    分子式:    228.31    分子量:    C9H16N4OS
 桑根白皮素    英文名称:    Mulberry root bark pigment    CAS号:    30-2006    分子式:        分子量:    
 氨基丙氟灵    英文名称:    Amino acrylic    CAS号:    29091-21-2    分子式:    350.29    分子量:    C13H17F3N4O4
 差向四环素    英文名称:    Differential tetracycline    CAS号:    23313-80-6    分子式:    480.9    分子量:    C22H25ClN2O8
 

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