骨形态发生抑制蛋白SOST抗体抗体的生物素化标记实验要点:

1.如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对 0.1mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5mol/L缓冲液充分透析;

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件;

3.用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活;

4.由于抗体的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此时可加入去污剂如 Triton x-100, Tween20等;

5.当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生物素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性;

6.生物素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及基,也可与糖基共价结合;

7.交联反应后,应充分透析,否则,残余的生物素会对生物素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用;

8.在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。
小鼠类胰岛素生长因子结合蛋白-2(mouse IGBPF-2)
小鼠类胰岛素生长因子结合蛋白-3(mouse IGBPF-3)
小鼠IgA(mouse IgA)
小鼠IgE(mouse IgE)
小鼠IgG(mouse IgG)
小鼠IgM(mouse IgM)
小鼠白介素-1a(mouse IL-1a)
小鼠白介素-1b(mouse IL-1b)
小鼠白介素-1RA(mouse IL-1ra)
小鼠白介素-2(mouse IL-2)
小鼠可溶性白介素-2受体(mouse sIL-2R)
小鼠白介素-3(mouse IL-3)
小鼠白介素-4(mouse IL-4)
小鼠白介素-5(mouse IL-5)
小鼠白介素-6(mouse IL-6)
小鼠白介素-7(mouse IL-7)
小鼠白介素-8(mouse IL-8)
小鼠白介素-9(mouse IL-9)
小鼠白介素-10(mouse IL-10)
小鼠白介素-12(mouse IL-12)
小鼠白介素-13(mouse IL-13)