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人晶状体上皮细胞养操作

214 人阅读发布时间:2022-09-28 14:32

人晶状体上皮细胞养操作:
产品仅供科研1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。      
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。  
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
DL-薄荷醇    DL-Menthol    89-78-1
薄荷醇    Menthol    2216-51-5
补骨脂定    Psoralidin    18642-23-4
补骨脂二氢黄酮    Bavachin    19879-32-4
补骨脂二氢黄酮甲醚    Bavachinin    19879-30-2
补骨脂酚    Bakuchiol    10309-37-2
补骨脂宁    Corylin    53947-92-5
补骨脂素    Psoralen    66-97-7
苍术素    Atractylodin    55290-63-6
草乌甲素    Bulleyaconitine A    107668-79-1
草质素    Herbacetin    527-95-7
草质素苷    Rhodionin    85571-15-9
梣酮    Fraxinellone    28808-62-0
茶黄素    Theaflavin    1011850
茶黄素-3'-没食子酸酯    Theaflavin-3'-gallate    28543-07-9
茶黄素-3-没食子酸酯    Theaflavin-3-gallate     30462-34-1
茶碱    Theophylline    58-55-9
柴胡皂苷A    Saikosaponin A    20736-09-8
柴胡皂苷B    Saikosaponin B     
柴胡皂苷B1    Saikosaponin B1    58558-08-0
柴胡皂苷B2    Saikosaponin B2    58316-41-9
柴胡皂苷C    Saikosaponin C    20736-08-7
柴胡皂苷D    Saikosaponian D    20874-52-6
蟾毒灵    Bufalin    68403-26-8
长春质碱    Catharanthine    2468-21-5
常春藤皂苷元    Hederagenin    465-99-6
 

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