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须毛癣菌LAMP试剂盒反应五要素
人阅读 发布时间:2022-07-13 16:22
须毛癣菌LAMP试剂盒反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
人催乳素(PRL)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human PRL (Prolactin) ELISA Kit
人肌红蛋白(MYO)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human MYO (Myoglobin) ELISA Kit
人肌钙蛋白T(Tn-T)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human Tn-T (Troponin T) ELISA Kit
人肌钙蛋白I(Tn-I)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human Tn-I (Troponin I) ELISA Kit
人妊娠相关浆蛋白A(PAPPA)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human PAPPA (Pregnancy Associated Plasma Protein A) ELISA Kit
人碱性磷酸酶(ALP)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human ALP (Alkaline Phosphatase) ELISA Kit
人半胱氨酸蛋白酶抑制剂(CSTA)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human CSTA (Cystatin A) ELISA Kit
人胰高血糖素样肽1(GLP-1)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human GLP-1 (Glucagon Like Peptide 1) ELISA Kit
人白介素1β(IL-1β)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human IL-1β (Interleukin 1 Beta) ELISA Kit
人白介素12(IL-12)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human IL-12 (Interleukin 12) ELISA Kit
人白介素12 p40(IL-12 p40)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human IL-12 p40 (Interleukin 12 p40) ELISA Kit
人铜蓝蛋白(CP)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human CP (Ceruloplasmin) ELISA Kit
人α-骨胶原交联(α-CTx)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human α-CTx (Alpha Crosslaps) ELISA Kit
人白细胞分化抗原CD42 (CD42)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human CD42 (Cluster of Differentiation 42) ELISA Kit
人白细胞抗原B27(HLA-B27)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human HLA-B27 (Human Leukocyte Antigen B27) ELISA Kit
人成纤维细胞生长因子受体2(FGFR2)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human FGFR2 (Fibroblast Growth Factor Receptor 2) ELISA Kit
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
人催乳素(PRL)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human PRL (Prolactin) ELISA Kit
人肌红蛋白(MYO)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human MYO (Myoglobin) ELISA Kit
人肌钙蛋白T(Tn-T)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human Tn-T (Troponin T) ELISA Kit
人肌钙蛋白I(Tn-I)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human Tn-I (Troponin I) ELISA Kit
人妊娠相关浆蛋白A(PAPPA)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human PAPPA (Pregnancy Associated Plasma Protein A) ELISA Kit
人碱性磷酸酶(ALP)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human ALP (Alkaline Phosphatase) ELISA Kit
人半胱氨酸蛋白酶抑制剂(CSTA)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human CSTA (Cystatin A) ELISA Kit
人胰高血糖素样肽1(GLP-1)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human GLP-1 (Glucagon Like Peptide 1) ELISA Kit
人白介素1β(IL-1β)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human IL-1β (Interleukin 1 Beta) ELISA Kit
人白介素12(IL-12)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human IL-12 (Interleukin 12) ELISA Kit
人白介素12 p40(IL-12 p40)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human IL-12 p40 (Interleukin 12 p40) ELISA Kit
人铜蓝蛋白(CP)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human CP (Ceruloplasmin) ELISA Kit
人α-骨胶原交联(α-CTx)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human α-CTx (Alpha Crosslaps) ELISA Kit
人白细胞分化抗原CD42 (CD42)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human CD42 (Cluster of Differentiation 42) ELISA Kit
人白细胞抗原B27(HLA-B27)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human HLA-B27 (Human Leukocyte Antigen B27) ELISA Kit
人成纤维细胞生长因子受体2(FGFR2)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human FGFR2 (Fibroblast Growth Factor Receptor 2) ELISA Kit