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人软骨细胞完全培养基使用步骤

505 人阅读发布时间:2022-03-02 13:44

人软骨细胞完全培养基使用步骤:

一)准确称量试剂:根据不同的菌类和用途,选择适宜的培养基,培养基所需试剂必须纯净。

(二)校正pH值:将称量好的培养基各种成分放入容器内,标记划线,加热溶解,补充水分,测定酸碱度,常用pH6.8~8.0的精密试纸或酸度计测定。用1N NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。

(三)过滤:将玻璃漏斗置铁架上,再用人软骨细胞完全培养基纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中,将上述培养基倒入其中过滤至透明。

(四)分装:将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内(试管内每支装5mL;三角瓶中装100~150ml),塞好棉塞用牛皮纸包扎好,准备灭菌。

(五)灭菌:培养基的灭菌,常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死,但细菌的芽胞有较强的抗热性,须经高压蒸汽灭菌才能达到彻底灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理,即压力越大,蒸汽温度就越高。因此,在同一温度条件下,采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下,菌体吸收水分后,其蛋白质易于凝固变性,因为蒸汽的穿透力强,杀菌效果好。
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使用产品时需注意以下事项:

1.使用前必须检查人软骨细胞完全培养基培养基,若培养基有被污染迹象或超过有效期不得使用。

2.采集的标本必须尽快接种培养,以保证结果准确。

3.培养基仅用于外部诊断。

4.培养后须做灭菌处理

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