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上海一研带您了解什么是血管紧张素转换酶
人阅读 发布时间:2022-01-26 15:03
血管紧张素转换酶主要是指人体周围和组织里的转换酶,可以促进血管里的紧张素Ⅱ生成增多,并且可以使一种激肽酶也是人体内的一种酶作用增强,使缓激肽降解增多,缓激肽降解增多和血管紧张素Ⅱ生成增多会导致血压升高。临床经常用的血管紧张素转换酶抑制剂就是卡托普利类,主要就是抑制一系列的过程而达到降压的作用。降压药还有减少尿蛋白的作用,还可以改善胰岛素抵抗,但是副作用是干咳和血管性水肿。
本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法。用抗人 ACE-2 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 ACE-2 与单抗结合,加入生物素化的抗人 ACE-2 ,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的 Streptavidin 与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,最后加终止液硫酸,在 450nm 处测 OD 值, ACE-2 浓度与 OD 值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中 ACE-2 浓度。
检测程序
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3. 每孔中加入第一抗体工作液 100ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 60 分钟。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液 100ul 。将反应板置 37 ℃ 30 分钟。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液 100ul ,置 37 ℃ 暗处反应 15 分钟。
8. 每孔加入 100ul 终止液混匀。
9. 30 分钟内用酶标仪在 45 0nm 处测 吸光值。
结果计算与判断
1. 所有 OD 值都应减除空白值后再行计算。
2. 以标准品 25 、 12.5 、 6.25 、 3.12 、 1.56 、 0.78 、 0.39 、 0 ng/ml 为横坐标, OD 值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。
3. 根据样品 OD 值在该曲线图上查出相应 ACE-2 含量 即可 。
试剂盒性能
1. 灵敏度 : 最小的 ACE-2 检测浓度小于 0.25ng/ml 。
2. 特异性: 可同时检测重组或天然的人 ACE-2 。 不与 人其它细胞因子有交叉反应。
3. 重复性:板内、板见变异系数均小于9.7 %。
本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法。用抗人 ACE-2 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 ACE-2 与单抗结合,加入生物素化的抗人 ACE-2 ,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的 Streptavidin 与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,最后加终止液硫酸,在 450nm 处测 OD 值, ACE-2 浓度与 OD 值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中 ACE-2 浓度。
检测程序
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3. 每孔中加入第一抗体工作液 100ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 60 分钟。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液 100ul 。将反应板置 37 ℃ 30 分钟。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液 100ul ,置 37 ℃ 暗处反应 15 分钟。
8. 每孔加入 100ul 终止液混匀。
9. 30 分钟内用酶标仪在 45 0nm 处测 吸光值。
结果计算与判断
1. 所有 OD 值都应减除空白值后再行计算。
2. 以标准品 25 、 12.5 、 6.25 、 3.12 、 1.56 、 0.78 、 0.39 、 0 ng/ml 为横坐标, OD 值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。
3. 根据样品 OD 值在该曲线图上查出相应 ACE-2 含量 即可 。
试剂盒性能
1. 灵敏度 : 最小的 ACE-2 检测浓度小于 0.25ng/ml 。
2. 特异性: 可同时检测重组或天然的人 ACE-2 。 不与 人其它细胞因子有交叉反应。
3. 重复性:板内、板见变异系数均小于9.7 %。