大鼠C-C趋化因子6(CCL6)酶联免疫elisa分析试剂盒操作步骤

大鼠C-C趋化因子6(CCL6)酶联免疫elisa分析试剂盒操作步骤:

1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在di一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟。
人正常来源细胞
人胚肾细胞；293 [HEK-293]
人包皮成纤维细胞；HFF
人胚肺成纤维细胞；MRC-5
人皮肤成纤维细胞；CCC-HSF-1
人羊膜细胞；WISH
人胚肺成纤维细胞；CCC-HPF-1
人胚皮肤成纤维细胞；CCC-ESF-1
人胚胎眼巩膜成纤维细胞；HFSF
人胚胎眼Tenon＇s囊成纤维细胞；HFTF
人肾皮质近曲小管上皮细胞；HK-2
人肾小管上皮细胞；HKC
人胚胎膀胱组织来源细胞；CCC-HB-2
人胚胎气管组织来源细胞；CCC-HBE-2
人胚肾二倍体细胞；CCC-HEK-1
人胚肝二倍体细胞；CCC-HEL-1
人胚胎心肌组织来源细胞；CCC-HEH-2
人胚胎肠粘膜组织来源细胞；CCC-HIE-2
人胚胎胰腺组织来源细胞；CCC-HPE-2
人胚胎肌肉组织来源细胞；CCC-HSM-2
人葡萄膜黑色素细胞；UM
人胚肺成纤维细胞；WI-38 [WI38]
SV40T转化的人胚肾细胞（亚系）；293T/17
293来源病毒包装细胞；ΦA
293来源病毒包装细胞；ΦA-GP
人永生化表皮细胞；HaCaT
SV-40转化肺成纤维细胞；WI38/VA13
人乳腺上皮细胞；MCF-10A
人胚肺成纤维细胞；MRC-5
人胚肺二倍体细胞；2BS
人胚肺二倍体细胞；KMB-17
人胚肾细胞；293 [HEK-293]
人脐静脉内皮细胞；HUV-EC
人肺细胞；HLF-a
人胚肺成纤维细胞；WI-38 [WI38]
人胎儿胸腺细胞株；HFT-8810 [HFT8810]
人胚肺成纤维细胞；HFL1
人胚肾细胞；293 [HEK-293]
人羊膜细胞；HA
人胚肺成纤维细胞；HFL-I
人肝细胞；HL-7702[L-02]