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仓鼠白介素6IL-6酶联检测试剂盒不正常的标准曲线原因

382 人阅读发布时间:2020-09-15 14:40

仓鼠白介素6IL-6酶联检测试剂盒不正常的标准曲线
1 错误的方法重悬标准品                            加入正确量的溶液重悬标准品,重悬充分
2 标准品稀释错误                                       按照说明书要求稀释标准品
3 标准品污染                                             使用一次性的灭菌吸头, 标准品贮存于2-8 ℃
4 错误的倍比稀释步骤                                按照说明书倍比稀释标准品
5 波长选择错误TMB为底物和以OPD为底物的试剂盒均有使用,而 前者比色波长为450nm,后者为492nm。双波长比色分析优于单波长。
6 标准品混用 不同批号试剂勿混用
7 试剂盒在运输途中时间太长,温度太高,标准品失活 尽量缩短运输时间,夏季应放冰块降温
8 ELISA未终止而直接检测450nm和620nmTMB显色需终止后检测,否则会出现620nm比450nm读数高的现象。
特点
1.专一性强。抗原与抗体的免疫反应是专一反应,而免疫酶技术以免疫反应为基础,所检测的对象是抗原(或抗体),使用的抗体除标记了酶以外,与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。
2.灵敏度高。由于抗体联结上了酶,因此,借助于酶与底物的显色反应,显示抗原与抗体的结合,大大提高了检测的灵敏性,使检测水平接近放射免疫测定法。
3.样品易保存。经过酶反应显示的有色产物大多比较稳定,因此有利于样品的保存。
4.结果易观察。对检测结果即可用肉眼观察,又可用显微镜观察,也可以用分光光度计进行比色测定,还可用显微镜观察。这是因为某些酶反应产物能使电子密度发生改变,从而引起被检测物的显示。
5.可以定量测定。溶液中的抗原物质,应用酶免吸附技术进行比色测定,依据光密度值的变化,可以定量。预计用细胞分光光度计可对组织内的抗原进行免疫酶技术的定量测定。
6.可以大规模测定样品。如有成千上万份样品需要进行检测,免疫酶技术都能在较短时间内完成。
7.仪器和试剂简单。对免疫没技术来说,不需要荧光显微镜,也不需要测定放射性的特殊仪器,所用仪器及试剂均属一般性仪器与试剂,普通实验室及生产应用单位均易购置.

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