干货!如何搭配流式抗体荧光标记？

前有云深不知处的三千家规，养成素衣若雪，美如冠玉，雅正端方，气度雍容的蓝二公子。他说了一句迷倒众生的话：我想带一个人回云深不知处，带回去，藏起来~~~o(*￣)￣*)o
                                                                       
现有“技深知来处”的三千技术贴，培养运斤成风，鬼斧神工，触手生春，自成一家的科研小达人。此时不管我们身在何处，要相信时间是最好的答案，我们等着你研究出让科研界倾倒的成果，等着你成为一颗耀眼的新星~~~
1.如何搭配流式抗体荧光标记？
流式抗体荧光标记搭配主要由3个因素决定：流式细胞仪能检测多少个通道、需要同时检测多少个指标、厂家的抗体有多少种荧光标记；流式细胞仪的通道越多，那么同一份样本能同时检测的表面/胞内/核内蛋白就越多。


2：如何根据流式细胞仪搭配流式抗体？
流式细胞仪能检测多少个通道是由仪器有多少根激光以及每根激光的功能决定的，所以首先需要注意两点：
•  流式细胞仪有哪些激光：比如，标配的FACSCalibur只有一根488nm的激光，能做FL1、FL2、FL3三个荧光通道/3个颜色，而选配的Calibur(FACSCalibur的简称)配有488nm和635nm两根激光，可以检测FL1-FL4四个通道/4个颜色。
• 不同型号的流式细胞仪的同样的一个通道检测荧光素的能力是不一样的：比如Calibur的FL3（第3通道）能检测PE-TexasRed, PE-Cy5, PerCP, PerCP-Cy5.5,PE-Cy7,而FACSAria的第3 通道只能检测PE-Texas Red,PE-Cy5, PerCP。Calibur第3通道能检测的PerCP-Cy5.5在FACSAria上是第4通道检测。Calibur和LSR都能检测4个颜色，但是第4个通道检测的荧光素是不一样的。