养的细胞形态怎么都不好

对于贴壁细胞，如果细胞形态不好或者细胞形态不清晰，表面似有异物等，可以在传代的时候进行如下操作：

首先，倒掉旧的培养基，加入 3 ml 新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走。然后再加入 3 ml 的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。巨噬细胞我只吹打，不消化。

其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内。培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。10 、20 、30 分钟观察一次。选择一个时间点，在已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入 3 ml 新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。我称之为「二传」。
 
如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞完美形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。

培养瓶内加入多少培养基？

这个是要靠自己针对自己养的细胞去摸索。并不是小的玻璃方瓶 要12 ml，大方瓶要 14 ml 。有些细胞反而是培养基少一点相反细胞形态会长得比较好。对于生长速度快的细胞，易生长的细胞加少一点培养基，细胞形态会更好。但是要注意换。