高产突变菌株遗传稳定性

高产突变菌株遗传稳定性分析对突变菌株 L-M1-2 及 L-M2-1 连续的传代培养，以 4 °C 保存的生长良好的第一代菌株为对照，结果表明，突变菌株 L-M1-2 第 1−5 代的相对发酵单位分别为 100%、99.3%、98.2%、100.3%、99.1%；突变菌株 L-M2-1 第 1−5 代的相对发酵单位分别是 100%、97.4%、99.5%、99.3%、101.2%。表明这两株高产突变菌株传 4 代以内，对恩拉霉素的发酵水平没有较为明显的影响，说明这两株突变菌株具有良好的遗传稳定性。

结论利用核糖体工程技术，对核糖体蛋白的结构进行修饰、改造，造成核糖体功能改变，可间接调控次级代谢产物的合成，从而获得突变的高产菌株。大量研究案例表明，利用该技术所进行的实验研究具有一定的可行性和实用性，在工业微生物育种中具有良好的应用前景。

本文利用核糖体工程技术，对恩拉霉素产生菌S. fungicidicus F1 中编码核糖体 S12 蛋白的基因rpsL 进行定点改造，将该蛋白中的第43 位的赖氨酸(Lys)替换为天冬酰胺(Asn)和精氨酸(Arg)，以安普霉素作为抗性遗传筛选标记，得到突变菌株 L-M1 和 L-M2，与野生菌株 F1 相比较，突变菌株恩拉霉素产量分别可提高11.9%和22.1%，并且遗传稳定性较好；突变后的菌株生长特性也发生了改变，能在较短时间内产生大量的孢子，大大缩短链霉菌的培养周期及恩拉霉素的生产周期，更适用于工厂大规模生产。同时，本实验结果也为核糖体蛋白其他位点的突变提供了可行性。

Oxymetholone CIII    200mg    羟甲稀龙标准品    434-07-1 
Oxytetracycline     200mg    土霉素标准品    6153-64-6 
Oxytetracycline Hydrochloride     200mg    盐酸土霉素标准品    2058-46-0 
Oxytocin Identification    15mg    羟可待酮鉴别标准品    6233-83-6 
Paclitaxel     200mg    紫杉醇标准品    33069-62-4 
Paclitaxel Impurity Mixture     10mg    紫杉醇杂质混合物标准品    
Padimate O     300mg    对二甲氨基苯甲酸异辛酯标准品    21245-02-3 
Palm Oil (AS)    1g    棕榈油标准品    8002-75-3 
Palmitic Acid     500mg    棕榈酸标准品    1957/10/3