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如何解冻血清才不会使产品质量受损?

507 人阅读发布时间:2018-01-26 09:51

解冻血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-20℃至4℃至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃),实验显示非常容易产生沉淀物。解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。请勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。

血清中沉淀物的出现有许多种原因,但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后也会存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物,并不影响血清本身的质量。若欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞您的过滤膜。
保存血清最好的方法是什么?
建议血清应保存在-5℃至-20℃。若存放于4℃,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至无菌离心管内,再放回冷冻。

实验显示,经过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染。

 5-羟色胺IgG     α-1抗胰糜蛋白酶    猪血管生成素受体/含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶2(Tie-2)
 5-羟色胺受体1AIgG     AP2关联激酶1    猪血管生成素2(ANG-2)
 5-羟色胺受体1BIgG     芳香胺N-乙酰化转移酶    猪血管生成素1(ANG-1)
 5-羟色胺受体2AIgG     丙氨酰tRNA合成酶2    猪血管内皮粘附分子1(VCAM-1/CD106)
 5-羟色胺受体2B(5-HT/serotonin R2B)IgG     α-1抗胰蛋白酶    猪血管内皮钙粘着蛋白复合体(VE-cad)
 5-羟色胺受体3IgG     AATK细胞凋亡关联酪氨酸激酶    猪血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ) 
 5-羟色胺受体4IgG     拮抗凋亡转录因子    猪心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)
 5-羟色胺转运蛋白IgG     腺苷三磷酸结合盒转运体A1    猪纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)

 

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